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靶点验证

寻找、分析、验证.

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鉴定并验证生物学靶点的功能

下一代快速可靠的生物样品基因组和蛋白组学检测技术的到来,为鉴定大量可以用于潜在的癌症治疗的靶点作出了贡献。然而,将潜在靶点转化为药理学备选需要彻底了解细胞进程的分子基础。

中美冠科生物为您提供复杂的工具集合,用以鉴定每个靶点的生物学功能,以及药理学干预的结果。

体内、体外实验技术

RNA干扰

利用RNA干扰(RNAi)特异性敲低目标基因是寻找和验证靶点的一个有力工具。利用小干扰RNA(SiRNA)可以在细胞系中瞬时下调目标基因,实现基因敲低。

我们的鲁棒的系统和流程能够确保目标基因及其编码蛋白的表达显著下降。

基因克隆和稳定转染

在哺乳动物细胞中重新或者加强目标基因的表达可以通过分子克隆实现,即在用于靶点验证的细胞中克隆并过表达感兴趣的基因。

我们利用一系列表达系统(包括脂质体和慢病毒载体)来转染野生型或者突变的基因(如持续表达或者激酶活性缺失突变)的持续的或可诱导的高水平表达。

在建立稳定表达的重组细胞系之后,可通过体内和体外实验观察基因过表达对下游的影响。

Real-Time PCR

实时PCR(RT-PCR)能够提供细胞系或组织的基因表达的定量比较, 并能够用于确定不同的基因表达水平是否与特定的细胞显型祥光。 在中美冠科生物我们还可以将RT-PCR与RNAi技术相结合,以验证基因表达变化。

靶点蛋白敲低和过表达

中美冠科生物常规利用包括Western Blot分析、流式细胞分析、免疫组化和免疫荧光分析在内的一系列实验验证靶点蛋白的敲低或者过表达情况。

体内、体外靶点验证

得益于我们的经过完善验证的 细胞系来源异体移植模型,人原代肿瘤细胞 (PrimePanel™) 和患者肿瘤样品,我们可以将体外临床前实验与体内数据相互关联,其结果可以转化成为临床患者的预后。

干涉某个基因功能的效果能够在体内利用小鼠异体移植模型进行验证,也可以在体外利用肿瘤组织或肿瘤来源的细胞悬液进行验证。 在我们的独有模型中,您的靶向药物的抑瘤活性可以直接测量,也可以对靶点特异性的生物标记进行检测。

报告基因分析

报告基因能够监控转录因子的表达上升及其在细胞核中的位置。将转录因子与报告基因相结合,可以使其转录并翻译,并在基底酶的存在下在体或者离体定量测量荧光强度。

我们提供一系列报告基因分析,用以实时测量特定的在体或者离体条件(如组织缺氧))或者跟踪肿瘤的生长与转移。

如需为您的靶点验证获取专业意见,请联系我们